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    食用菌菌种生产技术规程 Code of practice for spawn production of edible mushroom

    时间:2013-09-03 11:28:53  来源:  作者:

    标准类别  NY/T 农业行业推荐标准
    标准名称  食用菌菌种生产技术规程 Code of practice for spawn production of edible mushroom

    标准分类  种植业->水果、蔬菜及制品
    标准号  NY/T 528—2010

    被替代标准号  NY/T 528—2002

    颁布部门  中华人民共和国农业部

    颁布日期  2010-05-20

    实施日期  2010-09-01

    关键字  食用菌、菌种生产、技术规程
    标准内容  
    1  范围

    本标准规定了食用菌菌种生产的场地亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、厂房设置和布局亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、设备设施、使用品种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、生产工艺流程、技术要求、标签、标志、包装、运输和贮存等。

    本标准适用于不需要伴生菌的各种各级食用菌菌种生产亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    2  规范性引用文件

    下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

    GB 191  包装储运图示标志(GB 191—2008亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,ISO 780:1997亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,MOD)

    GB 9688  食品包装用聚丙烯成型品卫生标准

    GB/T 12728—2006  食用菌术语

    NY/T 1742—2009  食用菌菌种通用技术要求

    3  术语和定义

    GB/T 12728—2006界定的术语亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,以及下列术语和定义适用于本文件。为了便于使用,以下重复列出了GB/T 12728—2006中的一些术语和定义亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    3.1  食用菌  edible mushroom

    可食用的大型真菌亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,包括食用、食药兼用和药用三大类用途的种类。

    注:改写GB/T 12728—2006亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,定义2.1.4亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    3.2  品种  variety

    经各种方法选育出来的具特异性、一致(均一)性和稳定性可用于商业栽培的食用菌纯培养物亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    [GB/T 12728—2006,2.5.1]

    3.3  菌种  spawn

    生长在适宜基质上具结实性的菌丝培养物,包括母种、原种和栽培种。

    [GB/T 12728—2006,2.5.6]

    3.4  母种  stock culture

    经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物。也称一级种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、试管种。

    [GB/T 12728—2006,2.5.7]

    3.5  原种  mother spawn

    由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。也称二级种。

    [GB/T 12728—2006亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,2.5.8]

    3.6  栽培种  planting spawn

    由原种移植亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。栽培种只能用于栽培,不可再次扩大繁殖菌种。也称三级种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    [GB/T 12728—2006,2.5.9]

    3.7  种木  wood-pieces

    采用一定形状和大小的木质颗?;蚴髦ε嘌拇颗嘌?亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,也称种?;蛑种?。

    注:改写GB/T 12728—2006,定义2.5.24。

    3.8  固体培养基  solid medium

    以富含木质纤维素或淀粉类天然物质为主要原料,添加适量的有机氮源和无机盐类,具一定水分含量的培养基。常用的主要原料有:木屑、棉籽壳亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、秸秆亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、麦粒、谷粒、玉米粒等,常用的有机氮源有麦麸、米糠等亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,常用的无机盐类有硫酸钙亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、硫酸镁亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、磷酸二氢钾等亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。固体培养基包括以阔叶树木屑为主要原料的木屑培养基、以草本植物为主要原料的草料培养基、以禾谷类种子为主要原料的谷粒培养基亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、以粪草为主要原料的粪草发酵料培养基、以种?亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口;蛑种ξ饕系闹帜九嘌?、以棉籽壳为主要原料的棉籽壳培养基等亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    3.9  种性  characters of variety

    食用菌的品种特性亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,是鉴别食用菌菌种或品种优劣的重要标准之一亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。一般包括对温度、湿度亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、酸碱度亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、光线和氧气的要求亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,抗逆性、丰产性、出菇迟早、出菇潮数、栽培周期、商品质量及栽培习性等农艺性状亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    注:改写GB/T 12728—2006亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,定义2.5.4。

    3.10  批次  spawn batch

    同一来源、同一品种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、同一培养基配方亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、同一天接种、同一培养条件和质量基本一致的符合规定数量的菌种。每批次数量母种≥50支、原种≥200瓶(袋)、栽培种≥2000瓶(袋)。

    4  要求

    4.1  技术人员

    应有与菌种生产所需要的技术人员亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,包括检验人员。

    4.2  场地选择

    4.2.1  基本要求

    地势高燥,通风良好亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,排水畅通,交通便利。

    4.2.2  环境卫生要求

    300m之内无规模养殖的禽畜舍、垃圾和粪便堆积场,无污水亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、废气、废渣、烟尘和粉尘污染源,50m内无食用菌栽培场、集贸市场。

    4.3  厂房设置和布局

    4.3.1  设置和建造

    4.3.1.1  总则

    有各自隔离的摊晒场、原材料库亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、配料分装室(场)、灭菌室、冷却室、接种室亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、培养室亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、贮存室、菌种检验室等。厂房从结构和功能上应满足食用菌菌种生产的基本需要。

    4.3.1.2  摊晒场

    地面平整亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、光照充足、空旷宽阔、远离火源亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.3.1.3  原材料库

    防雨防潮亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,防虫亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、防鼠、防火、防杂菌污染亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.3.1.4  配料分装室(场)

    水电方便,空间充足。如安排在室外,应有天棚,防雨防晒。

    4.3.1.5  灭菌室

    水电安装合理,操作安全,通风良好,排气通畅、进出料方便,热源配套亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.3.1.6  冷却室

    洁净、防尘亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、易散热。

    4.3.1.7  接种室

    防尘性能良好,内壁和屋顶光滑,易于清洗和消毒亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,换气方便,空气洁净亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.3.1.8  培养室和贮存室

    内壁和屋顶光滑,便于清洗和消毒;墙壁厚度适当,利于控温、控湿亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,便于通风亚博体育网站官网_亚博体育官网入口;有防虫防鼠措施。

    4.3.1.9  菌种检验室

    水电方便,利于装备相应的检验仪器和设备亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.3.2  布局

    应按菌种生产工艺流程合理安排布局,无菌区与有菌区有效隔离亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.4  设备设施

    4.4.1  基本设备

    应具有磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、净化工作台或接种箱、调温设备、除湿设备、培养架、恒温箱或培养室、冰箱或冷库亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、显微镜等及常规用具亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。高压灭菌锅应使用经有资质部门生产与检验的安全合格产品亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.4.2  基本设施

    配料、分装、灭菌、冷却亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、接种、培养等各环节的设施应配套。冷却室、接种室、培养室和贮存室都要有满足其功能的基本配套设施亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,如控温设施、消毒设施。

    4.5  使用品种和种源

    4.5.1  品种

    从具相应技术资质的供种单位引种,且种性清楚。不应使用来历不明、种性不清、随意冠名的菌种和生产性状未经系统试验验证的组织分离物作种源生产菌种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.5.2  种源质量检验

    母种生产单位每年在种源进入扩大生产程序之前,应进行菌种质量和种性检验亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,包括纯度、活力亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、菌丝长势的一致性、菌丝生长速度亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、菌落外观等,并做出菇试验,验证种性。种源出菇试验的方法及种源质量要求亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,应符合NY/T 1742—2009中5.4的规定。

    4.5.3  移植扩大

    母种仅用于移植扩大原种,一支母种移植扩大原种不应超过6瓶(袋)亚博体育网站官网_亚博体育官网入口;原种移植扩大栽培种,一瓶谷粒种不应超过50瓶(袋),木屑种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、草料种不应超过35瓶(袋)。

    4.6  生产工艺流程

    培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养(检查)→成品。

    4.7  生产过程中的技术要求

    4.7.1  容器

    4.7.1.1  使用原则

    每批次菌种的容器规格要一致。

    4.7.1.2  母种

    使用玻璃试管或培养皿。试管的规格18mm×180mm或20mm×200mm。棉塞要使用梳棉或化纤棉,不应使用脱脂棉;也可用硅胶塞代替棉塞。

    4.7.1.3  原种

    使用850mL以下、耐126℃高温的无色或近无色的、瓶口直径≤4cm的玻璃瓶或近透明的耐高温塑料瓶,或15cm×28cm耐126℃高温符合GB 9688卫生规定的聚丙烯塑料袋。各类容器都应使用棉塞亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,棉塞应符合4.7.1.2规定;也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞。

    4.7.1.4  栽培种

    使用符合4.7.1.3规定的容器亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,也可使用≤17cm×35cm耐126℃高温符合GB 9688卫生规定的聚丙烯塑料袋亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。各类容器都应使用棉塞或无棉塑料盖亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,并符合4.7.1_3规定。

    使用耐126℃高温的具孔径0.2μm~0.5μm无菌透气膜的聚丙烯塑料袋亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,长宽厚为630mm×360mm×80μm,无菌透气膜2个,大小35mm×35mm,或495mm×320mm×60μm,无菌透气膜1个,大小35mm×35mm。

    4.7.2  培养原料

    4.7.2.1  化学试剂类

    化学试剂类原料如硫酸镁、磷酸二氢钾等,要使用化学纯或以上级别的试剂。

    4.7.2.2  生物制剂和天然材料类

    生物制剂如酵母粉和蛋白胨,天然材料如木屑、棉籽壳、麦麸等,要求新鲜、无虫、无螨、无霉、洁净亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、干燥亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.7.3  培养基配方

    4.7.3.1  母种培养基

    一般应使用附录A中第A.1章规定的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)或第A.2章规定的综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基(CPDA),特殊种类需加入其生长所需特殊物质亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,如酵母粉亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、蛋白胨亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、麦芽汁亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、麦芽糖等亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,但不应过富。严格掌握pH亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.7.3.2  原种和栽培种培养基

    根据当地原料资源和所生产品种的要求,使用适宜的培养基配方(见附录B),严格掌握含水量和pH值,培养料填装要松紧适度。

    4.7.4  灭菌

    培养基配制后应在4h内进锅灭菌亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。母种培养基灭菌0.11MPa~0.12MPa,30min。木屑培养基和草料培养基灭菌0.12MPa,1.5h或0.14MPa~0.15MPa,1h亚博体育网站官网_亚博体育官网入口;谷粒培养基、粪草培养基和种木培养基灭菌0.14MPa~0.15MPa,2.5h。装容量较大时亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,灭菌时间要适当延长亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。灭菌完毕后,应自然降压,不应强制降压。常压灭菌时,在3h之内使灭菌室温度达到100℃,保持100℃ 10h~12h。母种培养基、原种培养基、谷粒培养基、粪草培养基和种木培养基亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,应高压灭菌,不应常压灭菌亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。灭菌时应防止棉塞被冷凝水打湿。

    4.7.5  灭菌效果的检查

    母种培养基随机抽取3%~5%的试管,直接置于28℃恒温培养亚博体育网站官网_亚博体育官网入口;原种和栽培种培养基按每次灭菌的数量随机抽取1%作为样品,挑取其中的基质颗粒经无菌操作接种于附录A.1规定的PDA培养基中亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,于28℃恒温培养;48h后检查,无微生物长出的为灭菌合格。

    4.7.6  冷却

    冷却室使用前要进行清洁和除尘处理,然后转入待接种的原种瓶(袋)或栽培种瓶(袋),自然冷却到适宜温度。

    4.7.7  接种

    4.7.7.1  接种室(箱)的基本处理程序

    清洁→搬入接种物和被接种物→接种室(箱)的消毒处理。

    4.7.7.2  接种室(箱)的消毒方法

    应药物消毒后,再用紫外灯照射。

    4.7.7.3  净化工作台的消毒处理方法

    应先用75%酒精或新洁尔灭溶液进行表面擦拭消毒,之后预净20min亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.7.7.4  接种操作

    在无菌室(箱)或净化工作台上严格按无菌操作接种。每一箱(室)接种应为单一品种,避免错种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,接种完成后及时贴好标签。

    4.7.7.5  接种点

    各级菌种都应从容器开口处一点接种,不应打孔多点接种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.7.7.6  接种室(箱)后处理

    接种室(箱)每次使用后,要及时清理清洁,排除废气,清除废物亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,台面要用75%酒精或新洁尔灭溶液擦试消毒。

    4.7.8  培养室处理

    在使用培养室的前两天,采用无扬尘方法清洁,并进行药物消毒杀菌和灭虫亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.7.9  培养

    不同种类或不同品种应分区培养。根据培养物的不同生长要求,给予其适宜的培养温度(多在室温20℃~24℃),保持空气相对湿度在75%以下,通风,避光。

    4.7.10  培养期的检查

    各级菌种培养期间应定期检查亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,及时拣出不合格菌种亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    4.7.11  入库

    完成培养的菌种要及时登记入库。

    4.7.12  记录

    生产各环节应详细记录。

    4.7.13  留样

    各级菌种都应留样备查亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,留样的数量应以每个批号3支(瓶、袋)。草菇在13℃~16℃贮存亚博体育网站官网_亚博体育官网入口;除竹荪亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、毛木耳的母种不适于冰箱贮存外亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,其他种类有条件时,母种于4℃~6℃贮存;原种和栽培种于1℃~4℃下,贮存至使用者购买后在正常生产条件下该批菌种出第一潮菇(耳)亚博体育网站官网_亚博体育官网入口亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    5  标签、标志、包装、运输和贮存

    5.1  标签、标志

    出售的菌种应贴标签。注明菌种种类、品种、级别亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、接种日期、生产单位、地址电话等。外包装上应有防晒、防潮、防倒立亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、防高温、防雨、防重压等标志亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,标志应符合GB 191的规定。

    5.2  包装

    母种的外包装用木盒或有足够强度的纸盒,原种和栽培种的外包装用木箱或有足够强度的纸箱,盒(箱)内除菌种外的空隙用轻质材料填满塞牢。盒(箱)内附使用说明书。

    5.3  运输

    各级菌种运输时不得与有毒有害物品混装混运。运输中应有防晒亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、防潮亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、防雨、防冻、防震及防止杂菌污染的设施与措施。

    5.4  贮存

    应在干燥、低温、无阳光直射、无污染的场所贮存亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。草菇在13℃~16℃贮存;除竹荪、毛小耳母种不适于冰箱贮存外,其他种类有条件时,母种于4℃~6℃、原种和栽培种于1℃~4℃的冰箱或冷库内贮存亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    附录A

    (规范性附录)

    母种常用培养基及其配方

    A.1  PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)

    马铃薯200g(用浸出汁),葡萄糖20g,琼脂20g亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,水1000mL,pH自然。

    A.2  CPDA培养基(综台马铃薯葡萄糖琼脂培养基)

    马铃薯200g(用浸出汁)亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,葡萄糖20g亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,磷酸二氢钾2g,硫酸镁0.5g亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,琼脂20g亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,水1000mL亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,pH自然。

    附录B

    (规范性附录)

    原种和栽培种常用培养基配方及其适用种类

    B.1  以木屑为主料的培养基配方

    见B.1.1、B.1.2亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、B.1.3,适用于香菇亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、黑木耳、毛木耳、平菇亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、金针菇、滑菇亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、猴头菇、真姬菇等多数木腐菌类。

    B.1.1  阔叶树木屑78%,麸皮20%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,糖1%,石膏1%,含水量58%±2%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    B.1.2  阔叶树木屑63%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,棉籽壳15%,麸皮20%,糖1%,石膏1%,含水量58%±2%。

    B.1.3  阔叶树木屑63%,玉米芯粉15%,麸皮20%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,糖1%,石膏1%,含水量58%±2%。

    B.2  以棉籽壳为主料的培养基配方

    见B.2.1、B.2.2、B.2.3、B.2.4亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,适用于黑木耳亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、毛木耳、金针菇亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、滑菇、真姬菇、杨树菇、鸡腿菇、猴头菇、侧耳属等多数木腐菌类。

    B.2.1  棉籽壳99%,石膏1%,含水量60%±2%。

    B.2.2  棉籽壳84%~89%,麦麸10%~15%,石膏1%,含水量60%±2%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    B.2.3  棉籽壳54%~69%,玉米芯20%~30%,麦麸10%~15%,石膏1%,含水量60%±2%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    B.2.4  棉籽壳54%~69%,阔叶树木屑20%~30%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,麦麸10%~15%,石膏1%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,含水量60%±2%。

    B.3  以棉籽壳或稻草为主的培养基配方

    见B.3.1、B.3.2、B.3.3亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,适用于草菇亚博体育网站官网_亚博体育官网入口。

    B.3.1  棉籽壳99%,石灰1%,含水量68%±2%。

    B.3.2  棉籽壳84%~89%,麦麸10%~15%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,石灰1%,含水量68%±2%。

    B.3.3  棉籽壳44%,碎稻草40%,麦麸15%,石灰1%,含水量68%±2%。

    B.4  发酵料培养基配方

    见B.4.1、B.4.2,适用于双孢蘑菇、双环蘑菇亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、巴氏蘑菇等蘑菇属的种类。

    B.4.1  发酵麦秸或稻草(干)77%亚博体育网站官网_亚博体育官网入口,发酵牛粪粉(干)20%,石膏粉1%,碳酸钙2%,含水量62%±1%,pH7.5。

    B.4.2  发酵棉籽壳(干)97%,石膏粉1%,碳酸钙2%,含水量55%±1%,pH7.5。

    B.5  谷粒培养基

    小麦、谷子亚博体育网站官网_亚博体育官网入口、玉米或高粱97%~98%,石膏2%~3%,含水量50%±1%,适用于双孢蘑菇、双环蘑菇、巴氏蘑菇等蘑菇属的种类,也可用于侧耳属各种和金针菇的原种。

    B.6  以种木(枝)为主料的培养基

    阔叶树种木70%~75%,附录B.1.1配方的培养基25%~30%。适用于多数木腐菌类。

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